Για ασθένειες που προκαλούνται από ιογενείς λοιμώξεις, προκειμένου να διευκρινιστούν οι τύποι των ιών που πρέπει να αντιμετωπιστούν, μπορούν να πραγματοποιηθούν οι ακόλουθοι δύο τύποι επιθεωρήσεων:
1. Άμεση ανίχνευση του ίδιου του ιού
2. Μπορεί να ανιχνεύσει το αντιγόνο στην επιφάνεια του ιού και το νουκλεϊκό οξύ του ιού.
Το τεστ εντόπισε τα αντισώματα που παράγονται για να αντισταθούν στον ιό:
Υπό κανονικές συνθήκες, ο έλεγχος αντιγόνου δεν απαιτεί υψηλές εργαστηριακές συνθήκες και είναι κυρίως κατάλληλος για προσυμπτωματικό έλεγχο μεγάλης κλίμακας σε πρωτοβάθμια νοσοκομεία. Η εξέταση αντισωμάτων είναι εύκολη στη λειτουργία και τα αποτελέσματα της εξέτασης μπορούν να ληφθούν σε 10-15 λεπτά. Η ανίχνευση νουκλεϊκού οξέος απαιτεί πολλές εργαστηριακές συνθήκες, διακοπτόμενο προσωπικό και εξοπλισμό, αλλά η σελίδα αποτελεσμάτων είναι η πιο ευαίσθητη και ακριβής.
Από τα 10 νέα αντιδραστήρια ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος κοροναϊού που έχουν εγκριθεί, τα 8 από αυτά χρησιμοποιούν τη μέθοδο φθορίζουσας PCR και οι υπόλοιπες μέθοδοι ανίχνευσης είναι η μέθοδος συνδυασμένης αλληλουχίας πολυμερισμού αγκυρωμένου ανιχνευτή και η μέθοδος τσιπ ενίσχυσης σταθερής θερμοκρασίας.
1. Μέθοδος PCR φθορισμού
Η μέθοδος PCR αναφέρεται στην αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, η οποία μπορεί να αυξήσει σημαντικά την ίχνη του DNA. Όταν χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του νέου κοροναϊού, επειδή ο νέος κορωνοϊός είναι ιός RNA, είναι απαραίτητο να αντιστρέψουμε τη μεταγραφή του ιικού RNA σε DNA πριν από την πραγματοποίηση ανίχνευσης PCR.
Η αρχή της ανίχνευσης φθορισμού PCR είναι ότι καθώς προχωρά η PCR, τα προϊόντα της αντίδρασης συνεχίζουν να συσσωρεύονται και η ένταση του σήματος φθορισμού αυξάνεται επίσης αναλογικά. Τέλος, η αλλαγή στην ποσότητα του προϊόντος παρακολουθείται από την αλλαγή στην ένταση φθορισμού, λαμβάνοντας έτσι μια καμπύλη ενίσχυσης φθορισμού.
Αυτή είναι σήμερα η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος για την ανίχνευση νουκλεϊκού οξέος του νέου κοροναϊού. Ωστόσο, οι ακόλουθοι παράγοντες ενδέχεται να προκαλέσουν σφάλματα στα αποτελέσματα των δοκιμών:
Ακατάλληλη αποθήκευση ή αποτυχία υποβολής για δοκιμή: οι ιοί RNA αποικοδομούνται εύκολα. Επομένως, μετά τη λήψη δειγμάτων ασθενών, πρέπει να αποθηκευτούν με τυποποιημένο τρόπο και να ελέγχονται το συντομότερο δυνατό. Διαφορετικά, το αποτέλεσμα της δοκιμής είναι πιθανό να είναι ανακριβές.
Ερμηνεία σφαλμάτων των αποτελεσμάτων: Τα επί του παρόντος εγκεκριμένα προϊόντα δοκιμής επιλέγονται με βάση το ανοιχτό πλαίσιο ανάγνωσης 1a/b, την πρωτεΐνη φακέλου και την πρωτεΐνη νουκλεοκαψιδίου του νέου γονιδιώματος του κοροναϊού. Ωστόσο, οι εκκινητές ανίχνευσης και τα σχέδια ανιχνευτών διαφορετικών προϊόντων είναι διαφορετικά και υπάρχουν διαφορές στον εντοπισμό και την ερμηνεία των τμημάτων ενός στόχου, των τμημάτων διπλού στόχου και των τμημάτων τριών στόχων. Επομένως, εάν η ερμηνεία δεν εκτελείται αυστηρά σύμφωνα με τις διαφορετικές οδηγίες, μπορεί να οδηγήσει σε εσφαλμένη κρίση του αποτελέσματος.
2. Μέθοδος προσδιορισμού αλληλουχίας πολυμερισμού συνδυασμένου ανιχνευτή
Αυτή η ανίχνευση γίνεται κυρίως για τη χρήση ενός ειδικού οργάνου για την ανίχνευση της γονιδιακής αλληλουχίας που μεταφέρεται από τις νανοσφαίρες του DNA στη διαφάνεια προσδιορισμού αλληλουχίας.
Αυτό το είδος ανίχνευσης έχει υψηλή ευαισθησία και δεν είναι εύκολο να χάσει τη διάγνωση, αλλά τα αποτελέσματα επηρεάζονται επίσης εύκολα από πολλούς παράγοντες, όπως:
Δείγματα που δεν ελέγχθηκαν έγκαιρα: Όπως και η μέθοδος PCR φθορισμού, τα αποτελέσματα μπορεί να είναι ανακριβή εάν δεν αποθηκευτούν με τυποποιημένο τρόπο και δεν δοκιμαστούν το συντομότερο δυνατό.
Η θερμοκρασία δωματίου του χώρου δοκιμής είναι πολύ υψηλή: Αυτό θα επηρεάσει επίσης την ακρίβεια των αποτελεσμάτων της δοκιμής. Διαφορετικά όργανα δοκιμών και κιτ μπορεί επίσης να επηρεάσουν τα αποτελέσματα.
3. Μέθοδος τσιπ ενίσχυσης σταθερής θερμοκρασίας
Η ανίχνευση γονιδιακού τσιπ είναι μια από τις παραδοσιακές ιολογικές διαγνωστικές μεθόδους. Η αρχή ανίχνευσης είναι μια μέθοδος ανίχνευσης που αναπτύχθηκε με βάση τα συμπληρωματικά χαρακτηριστικά δέσμευσης των νουκλεϊκών οξέων, η οποία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ποιοτική ή ποσοτική μέτρηση των νουκλεϊκών οξέων που υπάρχουν στους οργανισμούς. Σε σύγκριση με την PCR, το τσιπ γονιδίου έχει υψηλότερο ρυθμό ακρίβειας και μικρότερο χρόνο, αλλά είναι επίσης πιο ακριβό και η απόδοση ανίχνευσης (η ποσότητα δεδομένων που μπορεί να δημιουργηθεί ανά μονάδα χρόνου) είναι σχετικά χαμηλότερη.
Το τσιπ θερμοστάτη που εγκρίθηκε αυτή τη φορά μπορεί να ανιχνεύσει έξι τύπους αναπνευστικών ιών, συμπεριλαμβανομένου του νέου κοροναϊού. Τα αποτελέσματα μπορούν να ληφθούν εντός 1,5 ώρας,
Σε σύγκριση με την PCR, το τσιπ γονιδίου έχει υψηλότερο ποσοστό ακρίβειας και μικρότερο χρόνο, αλλά η τιμή είναι πιο ακριβή και η απόδοση ανίχνευσης (η ποσότητα δεδομένων που μπορεί να δημιουργηθεί ανά μονάδα χρόνου) είναι σχετικά χαμηλότερη.
4. Ανίχνευση αντισωμάτων ιού
Τα αντιδραστήρια ανίχνευσης αντισωμάτων χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση αντισωμάτων IgM ή IgG που παράγονται από το ανθρώπινο σώμα μετά την είσοδο του ιού στο ανθρώπινο σώμα. Τα αντισώματα IgM εμφανίζονται νωρίτερα και τα αντισώματα IgG εμφανίζονται αργότερα.
Προς το παρόν, τα πέντε νέα αντιδραστήρια ανίχνευσης αντισωμάτων κορονοϊού που έχουν εγκριθεί χρησιμοποιούν τη μέθοδο του κολλοειδούς χρυσού και τη μέθοδο χημειοφωταύγειας μαγνητικών σωματιδίων.
5. Μέθοδος κολλοειδούς χρυσού
Η μέθοδος κολλοειδούς χρυσού χρησιμοποιεί χαρτί δοκιμής κολλοειδούς χρυσού για δοκιμές, το οποίο είναι το γρήγορο χαρτί δοκιμής που αναφέρεται συχνά επί του παρόντος.
Αυτό το είδος δοκιμαστικού χαρτιού έχει ειδική σήμανση και έχει τρύπες πάνω του, το οποίο χρησιμοποιείται για να στάζει το δείγμα ορού του εξεταζόμενου. Υπάρχουν δύο γραμμές στο χαρτί δοκιμής κολλοειδούς χρυσού, η μία ονομάζεται γραμμή δοκιμής και η άλλη ονομάζεται γραμμή ποιοτικού ελέγχου. Εάν και οι δύο γραμμές είναι έγχρωμες, σημαίνει θετικό. Μόνο η γραμμή ποιοτικού ελέγχου είναι έγχρωμη, που σημαίνει αρνητικό. εκτός από αυτές τις δύο περιπτώσεις, ανήκει στο Μη έγκυρο αποτέλεσμα.
