Ως θρεπτικό συστατικό που απαιτείται για την ανάπτυξη των κυττάρων, ο ρόλος του ορού στην κυτταρική καλλιέργεια είναι αυτονόητος και η ποιότητα και η στειρότητα του ορού είναι επίσης τα κλειδιά για τον προσδιορισμό της επιτυχίας του πειράματος. Λοιπόν, πώς να αδρανοποιήσουμε τον ορό; Αυτό απαιτεί τη χρήση φιαλών ορού.
Τα βήματα αδρανοποίησης ορού είναι τα εξής:
1. Επιλέξτε μια φιάλη που είναι ίδια με τη φιάλη ορού με τη φιάλη ελέγχου, ρίξτε τον ίδιο όγκο απσταγισμένου νερού με τον ορό στη φιάλη ελέγχου και μετρήστε τη θερμοκρασία.
2. Ρύθμιση θερμοκρασίας. Τοποθετήστε δύο θερμόμετρα υδραργύρου στη φιάλη της ομάδας ελέγχου και τοποθετήστε τα στο λουτρό νερού. Όταν το θερμόμετρο δείχνει 56 μοίρες, ρυθμίστε τη θερμοκρασία του λουτρού νερού βαθμονόμησης στους 56 βαθμούς.
3. Βάλτε τη φιάλη ορού και τη φιάλη ελέγχου μαζί σε ένα λουτρό νερού, ρυθμίστε τη θερμοκρασία στους 56 βαθμούς και κάντε ένα λουτρό νερού για μισή ώρα. Μετά την αδρανοποίηση, χωρίστε τα σε μπουκάλια, κάντε ασηπτικά πειράματα και αποθηκεύστε τα στους -70-20 βαθμούς.
4. Για να παρατηρήσετε το χρώμα και τη διαφάνεια του κατεψυγμένου ορού, εάν το χρώμα είναι κοκκινωπό ή το χρώμα είναι ελαφρύτερο με καθίζηση, αυτό σημαίνει ότι η ποιότητα του ορού δεν είναι καλή, οπότε είναι απαραίτητο να επιλέξετε έναν ορό καλής ποιότητας για αδρανοποίηση.
5. Η χρήση ορού θα πρέπει να αποφεύγει την επαναλαμβανόμενη απόψυξη, η οποία θα αυξήσει την πιθανότητα μόλυνσης του ορού και θα μειώσει την ποιότητα του ορού. Μόλις ο επανειλημμένα αποψυγμένος ορός κατακρημνιστεί, αυτό σημαίνει ότι ο ορός δεν είναι διαθέσιμος ή εξαιρετικά κακής ποιότητας.
6. Προκειμένου να διασφαλιστεί η σταθερότητα των πειραματικών αποτελεσμάτων, βεβαιωθείτε ότι ο ορός πρέπει να ανακινείται καλά κατά τη διαίρεση της φιάλης και, στη συνέχεια, διαιρέστε τη φιάλη και προσπαθήστε να χρησιμοποιήσετε τον ίδιο ορό για να εξασφαλίσετε την αρχή των ενιαίων μεταβλητών.
Τα παραπάνω είναι τα συγκεκριμένα βήματα αδρανοποίησης ορού χρησιμοποιώντας φιάλες ορού, αλλά αξίζει να σημειωθεί ότι στις περισσότερες καλλιέργειες κυττάρων, η θερμική αδρανοποίηση του ορού δεν είναι απαραίτητη. Σε πολλές περιπτώσεις, η αδρανοποίηση θερμότητας δεν βελτιώνει την ανάπτυξη των κυττάρων, αλλά αντίθετα καταστρέφει τον ορό και αυξάνει τις βροχοπτώσεις. Εκτός εάν η βιβλιογραφία υποδεικνύει ότι ο αδρανοποιημένος ορός πρέπει να χρησιμοποιείται για τα κύτταρα, το βήμα αδρανοποίησης θερμότητας ορού μπορεί γενικά να παραλειφθεί για την καλλιέργεια κυττάρων.
