Οι μέθοδοι λειτουργίας μας, οι λεπτομέρειες και οι θεωρητικές εξηγήσεις θα γίνουν οι κατευθυντήριες γραμμές για τη λειτουργία σας, όπως η τοποθέτηση διαλυμάτων θρεπτικών συστατικών και φιαλών κυττάρων. διαδικασίες αποστείρωσης· Για να μάθετε τη σωστή λειτουργία τους, είναι απαραίτητο να τους προσέξετε την πρώτη φορά.
Ανατροφή κυττάρων όπως η ανατροφή παιδιών
Τα κύτταρα είναι πραγματικά εύθραυστα. Είναι καλύτερο να το ελέγχετε κάθε μέρα για να αποτρέψετε μη φυσιολογικά φαινόμενα όπως έλλειψη νερού, διοξείδιο του άνθρακα, διακοπή ρεύματος και ανεπαρκή θερμοκρασία στη θερμοκοιτίδα. Είναι επίσης απαραίτητο να επιλυθούν έγκαιρα αυτά τα ατυχήματα για να αποφευχθεί μεγαλύτερος πόνος που προκαλείται από επαναλαμβανόμενα πειράματα. .
Τα καλά κύτταρα πρέπει να σπαρθούν εγκαίρως
Τα κύτταρα διοχετεύονται σε παρτίδες, έτσι ώστε ακόμη και αν μια παρτίδα αποτύχει, να υπάρχει εφεδρική. Μπορεί να μην είναι εύκολο για τον μέσο άνθρωπο όπως ο τελευταίος. Αλλά αυτό είναι το μάθημα του αίματος μου. Μόλις τα κελιά μολύνθηκαν, ολόκληρος ο στρατός εξαφανίστηκε. Τότε, λυπάμαι που δεν προστάτεψα τον σπόρο.
Κάθε κύτταρο έχει τα δικά του χαρακτηριστικά και πρέπει να αντιμετωπίζεται διαφορετικά.
Τα κύτταρα είναι ίδια με τους ανθρώπους και διαφορετικά κύτταρα έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά καλλιέργειας. Προσοχή στη διαδικασία καλλιέργειας. Διαφορετικές κυτταρικές σειρές χρησιμοποιούν διαφορετικά μέσα και ορό.
Για παράδειγμα, τα λεία μυϊκά κύτταρα που μεγαλώνω είναι πολύ δραστήρια και τους αρέσει να είναι ζωηρά. Σε 2-3 ημέρες, θα υπάρχει μεγάλος πληθυσμός και δεν μου αρέσει να τρώω και να πίνω πολύ. Είναι πραγματικά το καλύτερο παιδί για να μεγαλώσεις. Τα ενδοθηλιακά κύτταρα και τα λεία μυϊκά κύτταρα έχουν παρόμοιες προσωπικότητες, αλλά είναι πολύ ανθυγιεινά και ατημέλητα. Υπάρχουν πολλά εκκριτικά κύτταρα σε αυτά, επομένως πρέπει να αλλάζονται και να πλένονται συχνά. Τα κύτταρα RAW264.7 είναι επίσης πολύ χαρούμενα και πολύ βρώσιμα. Είναι απαραίτητο να τα ταΐζετε συχνά. Ο πονοκέφαλος είναι ότι τα κύτταρα ενεργοποιούνται εύκολα. Είναι καλό το μπουκάλι και το περιβάλλον στο οποίο καλλιεργούνται να είναι απαλλαγμένα από ενδοτοξίνες, αλλά είναι δύσκολο για μένα ως μητέρα να τα ικανοποιήσω.
Προετοιμασία για εργασία πριν την προπόνηση
Συμπεριλαμβανομένου του χειρισμού των αναλωσίμων, της διαμόρφωσης των αντιδραστηρίων, των δοκιμών στειρότητας κ.λπ.
Καθαρισμός γυάλινων σκευών. Για γυάλινα σκεύη (μπουκάλι κυττάρων, μπιμπερό που περιέχει θρεπτικό διάλυμα, μικρό μπουκάλι πενικιλίνης κ.λπ.), χρησιμοποιήστε πρώτα σκόνη πλυσίματος για να καθαρίσετε (προσοχή στις νεκρές γωνίες) και μετά ξεπλύνετε. Μουλιάστε σε διάλυμα οξέος για περισσότερες από 24 ώρες, στη συνέχεια ξεπλύνετε με καθαρό νερό 10 φορές για να αφαιρέσετε το υπολειμματικό διάλυμα οξέος. Τα μπουκάλια κ.λπ. ανακινούνται δυνατά κατά το ξέβγαλμα. Έπειτα εμποτίζεται σε διπλά απεσταγμένο νερό για 24 ώρες. Αφού στεγνώσει, τυλίξτε το και στεγνώστε το στους 160 βαθμούς για 2 ώρες.
Διαμόρφωση αντιδραστηρίου. Ως υγρό για κυτταρική καλλιέργεια, γενικά, μπορεί να χρησιμοποιηθεί περισσότερο από διπλά αποσταγμένο νερό. Και προσέξτε τη ρύθμιση της τιμής του pH.
Δοκιμή στειρότητας. Χρησιμοποιήστε κυρίως αποστείρωση με φίλτρο: όπως θρυψίνη, αντιβιοτικά, διάλυμα G-418, διάφορα μέσα, πυροσταφυλικό νάτριο, γλουταμίνη κ.λπ. Ορισμένα μπορούν να αποστειρωθούν σε αυτόκλειστο: PBS, D-Hank κ.λπ.
Τα αντιδραστήρια αποθηκεύονται σε κλάσματα
Συμπεριλαμβανομένου θρεπτικού διαλύματος, παγκρεατίνης, ορού κ.λπ.
Ο ορός είναι ιδιαίτερα σημαντικός. Ο ορός πρέπει να αποθηκεύεται σε -20 βαθμό . Εάν ένα μπουκάλι δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί κάθε φορά, το 40-50ml μπορεί να διανεμηθεί σε αποστειρωμένα μπουκάλια επεξεργασμένα με οξύ ή ακόμη και να αποθηκευτεί σε φιάλες πενικιλίνης. Γενικά, ο ορός που παρέχεται από τον κατασκευαστή είναι αποστειρωμένος και δεν απαιτεί αποστειρωμένη διήθηση. Εάν βρεθεί πολλή αιωρούμενη ύλη στον ορό, ο ορός μπορεί να προστεθεί στο μέσο και να φιλτραριστεί μαζί και ο ορός δεν πρέπει να φιλτράρεται απευθείας. (Καμία επίδραση στην κυτταρική καλλιέργεια υπό κανονικές συνθήκες)
Ο εμφιαλωμένος ορός πρέπει να αποψυχθεί σταδιακά: Το ψυγείο 4 βαθμών διαλύεται πλήρως και στη συνέχεια χωρίζεται σε συσκευασία. Κατά τη διαδικασία διάλυσης, πρέπει να ανακινείται τακτικά (προσοχή να μην προκληθούν φυσαλίδες αέρα) για να γίνει η θερμοκρασία και η σύνθεση ομοιόμορφη και να μειωθεί η εμφάνιση καθίζησης. Μην ξεπαγώνετε απευθείας από τους -20 βαθμούς έως τους 37 βαθμούς, καθώς η θερμοκρασία αλλάζει πολύ, γεγονός που μπορεί εύκολα να προκαλέσει πήξη πρωτεΐνης και καθίζηση.
Η απενεργοποίηση θερμότητας αναφέρεται στη θέρμανση του πλήρως αποψυγμένου ορού στους 56 βαθμούς για 30 λεπτά. Αφού το λουτρό νερού ανέβει στους 56 βαθμούς, βάλτε τον ορό, περιμένετε να ανέβει η θερμοκρασία στους 56 βαθμούς και μετρήστε το χρόνο, γενικά ανακινήστε το ομοιόμορφα μία φορά κάθε 5 λεπτά περίπου. Ο σκοπός αυτής της θερμικής επεξεργασίας είναι να απενεργοποιήσει τα συστατικά του συμπληρώματος στον ορό. Εκτός εάν είναι απαραίτητο, αυτή η θερμική επεξεργασία γενικά δεν εκτελείται γιατί θα προκαλέσει σημαντική αύξηση των ιζημάτων και θα επηρεάσει την ποιότητα του ορού. Δώστε προσοχή στην επίδραση της αλλαγής του ορού (συμπεριλαμβανομένων των διαφορετικών παρτίδων) στα κύτταρα.
Έντονη αίσθηση στειρότητας
Πριν από το πείραμα, ο εξαιρετικά καθαρός πάγκος αποστειρώθηκε με ακτινοβολία UV για 30 λεπτά, η ασηπτική επιφάνεια λειτουργίας σκουπίστηκε με 70 τοις εκατό αιθανόλη και ο εξαιρετικά καθαρός ανεμιστήρας πάγκου ενεργοποιήθηκε για λίγα λεπτά πριν ξεκινήσει η πειραματική λειτουργία .
Για να μάθετε περισσότερα σχετικά με την εργαστηριακή κυτταρική καλλιέργεια, κάντε κλικ στο: http://www.shjasw.com/
