Η αρχή της ανίχνευσης νουκλεϊκών οξέων
Αυτό το κιτ είναι προεπικαλυμμένο με νέο ανασυνδυασμένο αντιγόνο γονιδίου του κορωνοϊού (2019-nCoV)
πλάκα και με ενζυματικό μονοκλωνικό αντίσωμα αντι-ανθρώπινου IgA ως δείκτη, χρησιμοποιώντας έμμεση μέθοδο ELISA
Για την ποιοτική ανίχνευση του νέου αντισώματος IgA του κορωνοϊού (2019-nCoV) στον ανθρώπινο ορό.
Αφού το σύμπλοκο της αντίδρασης προστέθηκε στο υπόστρωμα ΤΜΒ, η αντίδραση τερματίστηκε και η OD κάθε φρεατίου μετρήθηκε σε μήκος κύματος 450 nm.
Το μέγεθος της τιμής OD είναι ανάλογο με το περιεχόμενο του προς ανίχνευση αντισώματος.
【Απαιτήσεις δειγμάτων】
1. Χρησιμοποιήστε δείγματα φρέσκου αίματος. Εάν χρειάζεται να τα αποθηκεύσετε, μπορείτε να τα βάλετε στο ψυγείο στους 2~8 βαθμούς για 48 ώρες ή να τα καταψύξετε στους -20 βαθμούς .
ζω. Αποφύγετε την επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και απόψυξη (πάνω από 3 φορές).
2. Αποφύγετε τη χρήση διαλυτών, θολό ή λιπαρών δειγμάτων.
3. Εάν το δείγμα πρέπει να μεταφερθεί, θα πρέπει να διατηρηθεί στους 2~8 βαθμούς ή να παγώσει.
4. Αποφύγετε την προσθήκη αντιπηκτικών ή προστατευτικών παραγόντων ή συντηρητικών στο δείγμα, ώστε να μην επηρεαστούν τα αποτελέσματα της εξέτασης.
【Μέθοδος επιθεώρησης】
1. Βγάλτε το κιτ από το ψυγείο και εξισορροπήστε το σε θερμοκρασία δωματίου (15 λεπτά), αφαιρέστε την προεπικαλυμμένη αντίδραση
πρέπει να επιβιβαστεί και να αποσυσκευαστεί. Αραιώστε το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης 1:30 με απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό για χρήση.
2. Αραίωση δείγματος: Αραιώστε το προς δοκιμή δείγμα με αραιωτικό δείγματος 1:100 (δείγμα 2uL---δείγμα
Αραιωτικό 200uL), ανακατεύουμε καλά (ή αραιώνουμε κατευθείαν στην πλάκα καλά, δηλαδή προσθέτουμε 200ul δείγματος αραιωτικού στην πλάκα, προσθέτουμε 2ul δείγματος και το ανακατεύουμε).
3. Προσθήκη δείγματος: Προσθέστε 100 uL του αραιωμένου δείγματος στο φρεάτιο της πλάκας (αν είναι αραιωμένο στο φρεάτιο της πλάκας, αυτό το βήμα δεν απαιτείται
βήμα). Ρυθμίστε έναν αρνητικό και έναν θετικό μάρτυρα (100 uL/πηγάδι, αδιάλυτο) σε κάθε πηγαδάκι και τοποθετήστε ένα τυφλό φρεάτιο ελέγχου
(Προσθέστε 100 uL αραιωτικού δείγματος), ανακινήστε και ανακατέψτε.
4. Επώαση: 30 λεπτά στους 37 βαθμούς. Ανακινήστε το υγρό στο φρεάτιο, πλύνετε το πιάτο 3 φορές με διάλυμα πλυσίματος, κάθε φορά
Αφού μείνετε για 30 δευτερόλεπτα, τινάξτε το υγρό στην τρύπα και στεγνώστε το πάνω στο απορροφητικό χαρτί.
5. Προσθέστε το συζυγές ενζύμου: 2 σταγόνες (ή 100uL) ανά φρεάτιο, ανακατέψτε καλά και επωάστε στους 37 βαθμούς για 20 λεπτά. Πλένετε 3 φορές όπως παραπάνω και στεγνώνετε.
6. Ανάπτυξη χρώματος: προσθέστε μια σταγόνα χρωματιστή Α και Β (ή 50 uL το καθένα) σε κάθε φρεάτιο, ανακινήστε και ανακατέψτε καλά, ρυθμίστε στους 37
Επωάστε για 10 λεπτά.
