Τρόποι για να αποφύγετε τη μόλυνση των κυττάρων: Συμβουλές για τη μεταφορά πιπέτας που πρέπει να γνωρίζετε
Μεταξύ των πολλών μεταβλητών που ελέγχονται στην κυτταρική καλλιέργεια, μία συγκεκριμένη μεταβλητή επηρεάζει ολόκληρο το πείραμα: η μόλυνση. Ένας παράγοντας που συμβάλλει στην κυτταρική μόλυνση δεν βρίσκεται πάντα στο ραντάρ, και παρόλο που μπορεί να επηρεάσει σιωπηλά την υγεία των κυττάρων και να επηρεάσει τα δεδομένα μετρήσεων, είναι η μόλυνση με πιπέτα.
Η επιλογή των πιπετών, των άκρων πιπέτας και των προγραμμάτων σιφώνισης λαμβάνει λίγη προσοχή κατά το σχεδιασμό πειραμάτων. Ακόμη και ένα γενικό διάλυμα (αυτόκαυστο) για την αποφυγή μόλυνσης με πιπέτα μπορεί να μην είναι τόσο αποτελεσματικό όσο πιστεύεται συνήθως.
Ο πρώτος κανόνας της κυτταρικής καλλιέργειας: αποφύγετε τη μόλυνση. Γιατί η στείρα τεχνική είναι τόσο σημαντική για επιτυχημένη κυτταρική καλλιέργεια;
Η άσηπτη τεχνική είναι ο μόνος τρόπος για να επιτευχθούν αξιόπιστα και αναπαραγώγιμα αποτελέσματα. Η ρύπανση μπορεί να επηρεάσει την ανάπτυξη των κυττάρων, το μεταβολισμό και την υγεία -- κάτι που ενδιαφέρονται να μελετήσουν οι επιστήμονες. Οι μολυσμένες κυτταρικές σειρές δεν έχουν τις επιθυμητές ιδιότητες και λειτουργούν διαφορετικά κάθε φορά, ανάλογα με τη σοβαρότητα της μόλυνσης. Επίσης, εάν οι μολυσματικοί παράγοντες υπεραναπτύξουν τα κύτταρα που σας ενδιαφέρουν, μπορεί να καταλήξετε να μελετήσετε τον λάθος οργανισμό.
Τι είδους ρύπους συναντούν συχνά οι επιστήμονες;
Συνήθεις πηγές μόλυνσης είναι τα βακτήρια, η μαγιά και η μούχλα. Στις εργασίες κυτταροκαλλιέργειας, το πιο δύσκολο να εντοπιστεί και να εξαλειφθεί είναι το μυκόπλασμα. Οι λιγότερο συνηθισμένοι τύποι μόλυνσης περιλαμβάνουν, για παράδειγμα, πλαστικά εκπλυμένα σε αναλώσιμα εργαστηρίου.
Ποιες είναι οι κοινές αιτίες μόλυνσης των κυττάρων;
Μια κοινή πηγή μόλυνσης είναι η κακή μεταφορά με σιφώνιο, όπως η χρήση μολυσμένων πιπετών και άκρων χωρίς φίλτρο. Επιπλέον, η έλλειψη καλών εργαστηριακών πρακτικών, όπως η ανεπαρκής απολύμανση εργαλείων όπως οι επωαστήρες ή οι θάλαμοι στρωτής ροής, είναι επίσης ένα ζήτημα. Για να αφαιρέσετε το μυκόπλασμα, απαιτείται διήθηση χρησιμοποιώντας ένα φίλτρο 0,1 μm αντί για ένα φίλτρο 0,2 μm.
Τρεις μολύνσεις με πιπέτα:
1. Μόλυνση από πιπέτα σε δείγμα: Η πιπέτα ή το άκρο της πιπέτας μολύνει το δείγμα.
Πώς να αποφύγετε:
Χρησιμοποιήστε αποστειρωμένα άκρα φίλτρου για να αποτρέψετε τη μόλυνση του σώματος της πιπέτας.
Αλλάζετε το άκρο της πιπέτας μετά από κάθε δείγμα.
Αποστειρώστε ή αποστειρώστε τις πιπέτες τακτικά με αιθανόλη. Επιλέξτε μια πιπέτα συμβατή με αυτόκλειστο.
2. Μόλυνση από δείγμα σε πιπέτα: Η εισαγωγή του δείγματος με σιφώνιο στο σώμα της πιπέτας μολύνει την πιπέτα.
Πώς να αποφύγετε:
Χρησιμοποιήστε άκρες φίλτρου ή άκρες θετικής μετατόπισης για να αποτρέψετε την είσοδο δειγμάτων στο σώμα της πιπέτας.
Κατά τη μεταφορά με πιπέτα, κρατήστε το σιφώνιο σε κατακόρυφη θέση. Αποθηκεύστε την πιπέτα σε όρθια θέση.
Γείρετε τη φιάλη κατά τη μεταφορά με πιπέτα.
Αφήστε το κουμπί αργά για να αποφύγετε το πιτσίλισμα του δείγματος μέσα στην πιπέτα. Επιλέξτε μια πιπέτα εξοπλισμένη με λειτουργία μαλακής εξαγωγής.
3. Μόλυνση μεταξύ των δειγμάτων: Τα υπολειμματικά δείγματα με πιπέτα μεταφέρονται στο επόμενο δείγμα. Συνήθως εμφανίζεται όταν το ίδιο άκρο χρησιμοποιείται πολλές φορές.
Πώς να αποφύγετε:
Αλλάζετε το άκρο της πιπέτας μετά από κάθε δείγμα.
Χρησιμοποιήστε άκρες φίλτρου ή άκρες θετικής μετατόπισης για να αποτρέψετε την είσοδο του δείγματος στο σώμα της πιπέτας και τη μετάβαση στο επόμενο δείγμα.
Βεβαιωθείτε ότι το άκρο της πιπέτας είναι σφραγισμένο πάνω στην πιπέτα για να αποφύγετε τη διαρροή δείγματος. Για παράδειγμα, η άκρη του Yongyue Medical.
Υπάρχουν παράγοντες μόλυνσης που μπορεί να μην γνωρίζουν καν οι επιστήμονες;
Η αποτελεσματικότητα του αυτόκλειστου συχνά δεν επαληθεύεται και εάν το αυτόκλειστο δεν λειτουργεί σωστά, τα άκρα της πιπέτας σε αυτόκλειστο μπορεί να μην είναι αποστειρωμένα. Τα προαποστειρωμένα φίλτρα τυλιγμένα σε προστατευτική συσκευασία είναι η ασφαλέστερη επιλογή για την πρόληψη τέτοιων ατυχημάτων. Η διαδικασία προ-αποστείρωσης για κορυφές πιπέτας υψηλής ποιότητας επικυρώνεται τακτικά για να διασφαλιστεί η αποτελεσματικότητα της προαποστείρωσης.
Πώς διευκολύνουν τους επιστήμονες να χειρίζονται τα δείγματα σε αποστειρωμένο περιβάλλον τα εργαλεία πιπέτας και διανομής;
Η επιλογή των σωστών σιφωνίων και άκρων πιπέτας μπορεί να διευκολύνει την ασηπτική ροή εργασίας. Οι ιατρικές πιπέτες Yongyue καθαρίζονται εύκολα και ανοίγουν χωρίς εργαλεία, επιταχύνοντας τον καθημερινό καθαρισμό. Δεδομένου ότι το αυτόκαυστο είναι πιο αποτελεσματικό στην απομάκρυνση της μόλυνσης από τα μαντηλάκια με αιθανόλη, οι μηχανικές πιπέτες Sartorius μπορούν να αποστειρωθούν πλήρως σε αυτόκλειστο, πράγμα που σημαίνει ότι μπορείτε να απολυμάνετε τις πιπέτες σας αξιόπιστα. Η εξώθηση του μαλακού άκρου αποτρέπει τον πιθανό κίνδυνο μόλυνσης από πιτσίλισμα όταν το άκρο εκτοξεύεται. Τα προαποστειρωμένα άκρα φίλτρου προστατεύουν τα δείγματά σας από διασταυρούμενη μόλυνση. Οι ιατρικές συμβουλές Yongyue συσκευάζονται επίσης σε στεγανή συσκευασία, πράγμα που σημαίνει ότι οποιαδήποτε μόλυνση υπό τις συνθήκες αποθήκευσης και παράδοσης δεν θα έρθει σε επαφή με τα άκρα ή το κουτί με τις άκρες.
Πώς μπορούν οι επιστήμονες να αποφύγουν τη ρύπανση; Ποιες είναι οι κορυφαίες συμβουλές σας για αποστειρωμένη εργασία;
Πρώτον, καλή εργαστηριακή πρακτική και προσεκτικός σχεδιασμός των βημάτων εργασίας. Βεβαιωθείτε ότι διατηρείτε μόνο ό,τι χρειάζεται για μια συγκεκριμένη ροή εργασίας στο θάλαμο στρωτής ροής και χρησιμοποιείτε ταυτόχρονα μία κυτταρική καλλιέργεια. Επιπλέον, οι τακτικές δοκιμές για μολυσματικές ουσίες όπως το μυκόπλασμα σας προσφέρουν ηρεμία και εμπιστοσύνη στα αποτελέσματά σας. Όταν εργάζεστε υπό αποστειρωμένες συνθήκες, τα χρήματα που δαπανώνται για προαποστειρωμένα άκρα φίλτρου και αποστειρωμένα αντιδραστήρια αξίζουν τα χρήματα.
