Ποια είναι η έννοια της ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος PCR, μέθοδοι και βήματα
Η δοκιμή νουκλεϊκού οξέος είναι επί του παρόντος ένας αποτελεσματικός τρόπος για να προσδιοριστεί εάν ο ιός μεταφέρει τον νέο κορωνοϊό. Προς το παρόν, οι άνθρωποι χρησιμοποιούν κυρίως ρινικά επιχρίσματα, επιχρίσματα λαιμού και ορό αντισωμάτων lgm για αναφορά. Αλλά σύμφωνα με τις πιο πρόσφατες απαιτήσεις εισόδου στη Σιγκαπούρη, πραγματοποιείται δοκιμή νουκλεϊκού οξέος PCR, οπότε τι σημαίνει δοκιμή νουκλεϊκού οξέος PCR;
Ποια είναι η σημασία της ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος PCR
PCR σημαίνει αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, η οποία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ενίσχυση του DNA, έτσι ώστε να ενισχυθεί μια μικρή ποσότητα DNA στο βαθμό που μπορεί να ανιχνευθεί. Το νουκλεϊκό οξύ ορισμένων ιών είναι το DNA και αυτή η μέθοδος πρέπει να χρησιμοποιηθεί για ανίχνευση. Επομένως, η PCR δεν είναι έλεγχος που πραγματοποιείται, αλλά μέθοδος ανίχνευσης DNA. Για παράδειγμα, η ποσοτικοποίηση του DNA του ιού της ηπατίτιδας Β χρησιμοποιεί αυτή τη μέθοδο. Ο σκοπός της επιθεώρησης DNA είναι αφενός η διάγνωση της νόσου. Εάν ακόμη και το DNA του παθογόνου μπορεί να ανιχνευθεί, σημαίνει ότι το παθογόνο έχει μολυνθεί. Από την άλλη πλευρά, είναι να κρίνουμε πόσο έχει πολλαπλασιαστεί ο ιός, ώστε να κρίνουμε τη σοβαρότητα της νόσου ή το αποτέλεσμα της θεραπείας.
Μέθοδοι και στάδια ανίχνευσης νουκλεϊκών οξέων PCR
Η δοκιμή νουκλεϊκού οξέος απαιτεί πέντε βήματα: δειγματοληψία, διατήρηση δείγματος, κατακράτηση, εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος και δοκιμή υπολογιστή.
Το πρώτο βήμα στην ανίχνευση νουκλεϊκού οξέος είναι η συλλογή ανθρώπινων εκκρίσεων και το σκούπισμα της ρινικής κοιλότητας ή του οπίσθιου τοιχώματος του φάρυγγα και των αμφοτερόπλευρων φαρυγγικών αμυγδαλών με μια ρινική εξέταση ή μια φαρυγγική εξέταση.
Στο δεύτερο βήμα, το ιατρικό προσωπικό κράτησε το δείγμα, βύθισε την κεφαλή του δοκιμαστικού τεμαχίου στο διάλυμα συντήρησης κυττάρων και βίδωσε το καπάκι του σωλήνα αμέσως μετά το σπάσιμο της ουράς.
Στο τρίτο μέρος, βάλτε το δείγμα σε αεροστεγή σακούλα, κρατήστε το και στείλτε το για έλεγχο έγκαιρα.
Το τέταρτο βήμα είναι η αποστολή του δείγματος στο εργαστήριο για την εξαγωγή νουκλεϊκού οξέος.
Στο πέμπτο στάδιο, το εκχύλισμα υποβάλλεται σε μια αντίδραση ενίσχυσης φθορίζουσας PCR.
Τι είναι το νουκλεϊκό οξύ
Το νουκλεϊκό οξύ (νουκλεϊκό οξύ) είναι ένας τύπος βιολογικού μακρομορίου που αποτελείται από νουκλεοτίδια (νουκλεοτίδιο), χωρισμένο σε ριβονουκλεϊκό οξύ (RNA) και δεοξυριβονουκλεϊκό οξύ (DNA), στο οποίο το RNA είναι ως επί το πλείστον δομή μονής αλυσίδας, το DNA είναι ως επί το πλείστον δίκλωνη δομή. Εκτός από το πριόν, το νουκλεϊκό οξύ είναι ένα βιολογικό μακρομόριο απαραίτητο για τη ζωή. Η κύρια λειτουργία του είναι να αποτελεί τον φορέα γενετικής πληροφορίας της ζωής. Επιπλέον, ορισμένα νουκλεϊκά οξέα μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως και να συμμετέχουν στο σχηματισμό βιολογικά ενεργών ενζύμων. Μόρια ή άλλες μοριακές μηχανές.
Τι είναι η δοκιμή νουκλεϊκού οξέος
Η ανίχνευση νουκλεϊκών οξέων, όπως υποδηλώνει το όνομα, είναι η ανίχνευση νουκλεϊκών οξέων.
Ποια είναι τα μοναδικά πλεονεκτήματα της δοκιμής νουκλεϊκού οξέος; Γιατί μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως"χρυσό πρότυπο" για τη διάγνωση του νέου κορωνοϊού;
Στην πραγματικότητα, κάθε μέθοδος ανίχνευσης έχει τα δικά της σενάρια εφαρμογής. Λαμβάνοντας ως παράδειγμα την ανίχνευση ιού, το αντικείμενο ανίχνευσης των συνήθων μεθόδων ανοσολογικής ανίχνευσης (κολλοειδής χρυσός, ELISA, χημειοφωταύγεια, κ.λπ.) είναι το αντιγόνο ή το αντίσωμα του ιού, το οποίο είναι ισοδύναμο με"πλευρικό σχέδιο". Δεδομένου ότι υπάρχει ένα χρονικό διάστημα από τη μόλυνση έως την ανιχνευσιμότητα, οι μέθοδοι ανοσολογικής ανίχνευσης γενικά δεν είναι κατάλληλες για έγκαιρη διάγνωση.
Ποια είναι η έννοια της ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος PCR, μέθοδοι και βήματα
Ψευδοθετικά και ψευδώς αρνητικά
1. Λάθος θετικό
Συνήθως υπάρχουν λιγότερα ψευδώς θετικά. Γενικά, η ακατάλληλη λειτουργία του προσωπικού του εργαστηρίου μπορεί να οδηγήσει σε διασταυρούμενη μόλυνση μεταξύ των δειγμάτων ή υπολειμματική μόλυνση ενισχυμένων προϊόντων. Σε αυτή την περίπτωση, μπορεί να προκληθούν ψευδώς θετικά αποτελέσματα.
Ωστόσο, τα ψευδώς θετικά μπορούν να παρακαμφθούν αποτελεσματικά με τον αυστηρό έλεγχο της διαδικασίας ανίχνευσης και την εφαρμογή μιας στρατηγικής τυχαίας συμμετοχής στον εντοπισμό πολλών αρνητικών δειγμάτων.
2. Ψευδής αρνητικός
Αυτό που πρέπει να εξηγηθεί εδώ είναι ότι τα ψευδώς αρνητικά στην ανίχνευση PCR και τα κλινικά ψευδώς αρνητικά δεν είναι στην πραγματικότητα η ίδια έννοια.
Λαμβάνοντας για παράδειγμα τη διάγνωση του νέου κοροναϊού, η οποία συζητείται έντονα στο Διαδίκτυο, τα κλινικά ψευδώς αρνητικά αναφέρονται σε περιπτώσεις όπου τα κλινικά συμπτώματα και οι απεικονιστικές μελέτες είναι πολύ ύποπτα για μόλυνση, αλλά το τεστ PCR είναι επανειλημμένα ή πάντα αρνητικό. και το ψευδώς αρνητικό τεστ PCR αναφέρεται στο συλλεχθέν. Υπάρχει επαρκής ποσότητα του νέου κοροναϊού στο δείγμα αλλά δεν έχει ανιχνευθεί.
Για να αποφευχθούν ψευδώς αρνητικά στις δοκιμές νουκλεϊκού οξέος, οι κύριες ανάγκες που πρέπει να επιλυθούν είναι: (1) υπάρχει επαρκής ιός στα κύτταρα του μολυσμένου ατόμου, (2) κύτταρα που περιέχουν τον ιό μπορούν να συλλεχθούν στο συλλεγμένο δείγμα και (3 ) ανιχνεύεται ο ιός στο δείγμα Αυτοί οι τρεις σύνδεσμοι.
Μεταξύ αυτών, οι τεχνικές παράμετροι των κιτ PCR επηρεάζουν κυρίως τον τρίτο σύνδεσμο ανίχνευσης.
Μόνο για τον τρίτο σύνδεσμο δοκιμής, εάν ο αριθμός των ιών στο δείγμα είναι κάτω από ένα ορισμένο επίπεδο (κάτω από το ελάχιστο όριο ανίχνευσης), το κιτ PCR δεν θα μπορεί να τον ανιχνεύσει. Από αυτή την άποψη, τα ψευδώς αρνητικά στην ανίχνευση PCR δεν μπορούν να αποφευχθούν εντελώς. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο είναι απαραίτητο να συμπληρωθεί η ανάπτυξη τεστ αντισωμάτων ειδικών για τον ιό.
